器具清洗

 

將玻璃套管、研磨杵、配套密封蓋全部取出，用清水沖洗，再用去污劑浸泡去除殘留蛋白、組織殘?jiān)?，沖洗干凈后烘干備用。若用于微量生物樣品，可提前用乙醇擦拭消毒，晾干后使用，避免雜質(zhì)、微生物污染樣品。檢查玻璃部件有無裂紋、缺口，研磨杵與套管內(nèi)壁貼合度良好，無明顯卡頓、間隙過大情況，破損玻璃器具禁止使用。

 

樣品分裝

 

剪碎待處理組織，切成細(xì)小碎塊，放入玻璃套管底部，按實(shí)驗(yàn)需求加入緩沖液、提取溶劑，液體總量不宜超過套管容積三分之二，防止研磨過程液體溢出。硬質(zhì)、大塊組織盡量提前剪至細(xì)碎，減少研磨阻力，避免用力過猛造成玻璃碎裂。

 

裝配固定

 

將研磨杵緩慢插入套管內(nèi)部，手持套管底部固定，搭配配套夾具將套管夾緊，防止研磨時(shí)套管滑動(dòng)、傾倒；電動(dòng)款勻漿器需將研磨杵上端連接電機(jī)夾持頭，確認(rèn)連接牢固。

 

二、研磨勻漿操作

 

手動(dòng)研磨操作

 

一手穩(wěn)固握住套管，另一手握住研磨杵手柄，垂直方向上下反復(fù)推拉研磨，推拉過程中緩慢旋轉(zhuǎn)研磨杵，讓樣品充分與玻璃內(nèi)壁摩擦、剪切。力度輕柔均勻，不要大力猛壓，防止玻璃管壁受壓開裂。每研磨數(shù)十次后，短暫提起研磨杵，讓底部樣品重新分散，避免局部物料堆積研磨不充分，反復(fù)操作至組織破碎、液體呈均勻混懸狀態(tài)。

 

電動(dòng)研磨操作

 

低速啟動(dòng)電機(jī)，研磨杵低速上下往復(fù)運(yùn)動(dòng)，根據(jù)組織軟硬程度調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速；硬質(zhì)組織采用低速多次研磨，軟質(zhì)細(xì)胞樣品可適當(dāng)提高轉(zhuǎn)速。研磨過程留意套管內(nèi)液體狀態(tài)，若出現(xiàn)大量泡沫可降低轉(zhuǎn)速，防止樣品蛋白變性；全程手扶套管固定，避免高速震動(dòng)導(dǎo)致套管脫落。

 

研磨程度判斷

 

肉眼觀察無明顯組織碎塊，液體質(zhì)地均勻細(xì)膩，無肉眼可見固體顆粒，即為研磨完成；若需要超細(xì)勻漿，可延長研磨時(shí)間，增加往復(fù)研磨次數(shù)。

 

三、取樣與分離

 

研磨完成后停止操作，緩慢提起研磨杵，用少量緩沖液沖洗研磨杵外壁附著的樣品，洗液并入套管內(nèi)混勻。將勻漿液體轉(zhuǎn)移至離心管、收集管中，按需進(jìn)行離心、提取、檢測等后續(xù)操作，套管底部殘留未破碎的組織殘?jiān)缮釛墶?/div>